У биолошким истраживањима обично се користе полипептиди са дугачком секвенцом.За пептиде са више од 60 аминокиселина у секвенци, експресија гена и СДС-ПАГЕ се генерално користе за њихово добијање.Међутим, овај метод траје дуго и ефекат одвајања крајњег производа није добар.
Изазови и решења за дугу синтезу пептида
У синтези дугих пептида, увек се суочавамо са проблемом, односно, стерична сметња реакције кондензације расте са повећањем секвенце у синтези, а време реакције је потребно прилагодити да би реакција била потпуна.Међутим, што је дуже време реакције, производи се више нежељених ефеката и формира се део циљног пептида.Такви остаци – дефицитарни пептидни ланци су кључне нечистоће настале у дугој пептидној синтези.Стога, у синтези дугог пептида, кључни проблем који морамо да превазиђемо је да истражимо висококвалитетне реакционе услове и реакционе методе, како бисмо реакцију кондензације аминокиселина учинили свеобухватнијом и потпунијом.Поред тога, смањите време реакције, јер што је дуже време реакције, то су нежељене реакције неконтролисане, нуспроизводи су сложенији.Дакле, следеће три тачке су сумиране:
Микроталасна синтеза се може користити: За неке аминокиселине које се сусрећу у процесу синтезе које није лако интегрисати, може се користити микроталасна синтеза.Ова метода има изванредне резултате и у великој мери смањује време реакције и смањује формирање два кључна нуспроизвода.
Може се користити метода синтезе фрагмената: Када је неке пептиде тешко синтетизовати уобичајеним методама синтезе и није лако пречистити, можемо усвојити целу кондензацију неколико аминокиселина у одређеном сегменту пептида у пептидни ланац као целину.Овај метод такође може да реши многе проблеме у синтези.
Може се користити синтеза ацилхидразида: ацилхидразид синтеза пептида је метода чврсте фазе синтезе Н-терминалног Цис пептида и Ц-терминалног полипептида хидразида хемијска селективна реакција између формирања амидних веза за постизање методе пептидног везивања.На основу положаја Цис у пептидном ланцу, овај метод дели цео пептидни ланац на више секвенци и респективно их синтетише.Коначно, циљни пептид се добија реакцијом кондензације у течној фази.Овај метод не само да у великој мери смањује време синтезе дугог пептида, већ и значајно повећава чистоћу финалног производа.
Дуго пептидно пречишћавање
Посебност дугих пептида неизбежно доводи до сложених компоненти сирових пептида.Стога је такође изазов пречишћавање дугих пептида помоћу ХПЛЦ.амилоидна серија процеса пречишћавања полипептида, апсорбује много искуства и успешно се користи у пречишћавању дугог пептида.Усвајањем нове опреме, мешањем вишеструких система за пречишћавање, поновљеним одвајањем и другим искуственим методама, стопа успеха дугог пречишћавања пептида је знатно побољшана.
Време поста: 18. април 2023