Као инструмент високе прецизности, ХПЛЦ може лако довести до неких проблематичних малих проблема ако се њиме не рукује на исправан начин током употребе.Један од најчешћих проблема је проблем компресије колоне.Како брзо решити проблем са неисправним хроматографом.ХПЛЦ систем се углавном састоји од боце резервоара, пумпе, ињектора, колоне, температурне коморе колоне, детектора и система за обраду података.За цео систем, стубови, пумпе и детектори су кључне компоненте и главне локације које су подложне проблемима.
Кључ за притисак у колони је област којој је потребна посебна пажња када се користи ХПЛЦ.Стабилност притиска у колони је уско повезана са обликом хроматографског врха, ефикасношћу колоне, ефикасношћу одвајања и временом задржавања.Стабилност притиска у колони не значи да је вредност притиска стабилна на стабилној вредности, већ да је опсег флуктуације притиска између 345кПа или 50ПСИ (омогућава употребу градијентног елуирања када је притисак у колони стабилан и полако се мења).Превисок или пренизак притисак је проблем притиска у колони.
Најсклонији ХПЛЦ кваровима и решењима
1, високи притисак је најчешћи проблем у употреби ХПЛЦ.То значи нагли пораст притиска.Уопштено говорећи, постоје следећи разлози: (1) Генерално, ово је због блокаде канала протока.У овом тренутку, требало би да га испитамо по комадима.а.Прво одрежите улаз вакуумске пумпе.У овом тренутку, ПЕЕК епрувета је била напуњена течношћу тако да је ПЕЕК цев била мања од боце са растварачем да би се видело да ли течност капље по жељи.Ако течност не капље или капље споро, глава филтера за растварач је блокирана.Третман: Потопити у 30% азотну киселину пола сата и испрати ултра чистом водом.Ако течност капље насумично, глава филтера за раствараче је нормална и проверава се;б.Отворите вентил за прочишћавање тако да мобилна фаза не прође кроз колону, а ако притисак није значајно смањен, бела глава филтера је блокирана.Третман: Филтриране беле тачке су уклоњене и соникиране са 10% изопропанола пола сата.Под претпоставком да притисак падне испод 100ПСИ, филтрирана бела глава је нормална и проверава се;ц.Уклоните излазни крај колоне, ако се притисак не смањи, колона је блокирана.Лечење: Ако је у питању блокада пуферске соли, исперите 95% док притисак не постане нормалан.Ако је опструкција узрокована неким боље очуваним материјалом, треба искористити јачи проток од садашње мобилне фазе да се јури ка нормалном притиску.Ако се дуготрајни притисак чишћења не смањи према горе наведеној методи, може се сматрати да су улаз и излаз колоне повезани са инструментом напротив, а колона се може очистити мобилном фазом.У овом тренутку, ако притисак у колони и даље није смањен, улазна плоча сита за колону може се само заменити, али када операција није добра, лако је довести до смањења ефекта колоне, па покушајте да користите мање.За тешке проблеме може се размотрити замена колоне.
(2) Погрешно подешавање брзине протока: Тачна брзина протока се може ресетовати.
(3) Нетачан однос протока: индекс вискозности различитих пропорција протока је различит, а одговарајући системски притисак протока већег вискозитета је такође већи.Ако је могуће, растварачи нижег вискозитета се могу заменити или поново подесити и припремити.
(4) Померање нуле притиска у систему: подесите нулу сензора нивоа течности.
2, притисак је пренизак (1) обично је узрокован цурењем система.Шта да радите: Пронађите сваку везу, посебно интерфејс на оба краја колоне, и затегните место цурења.Уклоните стуб и затегните или обложите ПТФЕ фолију одговарајућом силом.
(2) Гас улази у пумпу, али притисак је обично нестабилан у овом тренутку, висок и низак.Још озбиљније, пумпа неће моћи да апсорбује течност.Метода третмана: отворите вентил за чишћење и очистите брзином од 3~5мл/мин.Ако није, ваздушни мехурићи су усисани на издувном вентилу помоћу наменске иглене цеви.
(3) Нема одлива мобилне фазе: проверите да ли постоји мобилна фаза у боци резервоара, да ли је судопер уроњен у мобилну фазу и да ли пумпа ради.
(4) Референтни вентил није затворен: референтни вентил је затворен након успоравања.Обично се спушта на 0,1.~ 0,2 мЛ/мин након затварања референтног вентила.
резиме:
У овом раду анализирају се само уобичајени проблеми течне хроматографије.Наравно, у нашој практичној примени наићи ћемо на више других проблема.У руковању грешкама, требало би да следимо следеће принципе: мењајте само један по један фактор да бисте утврдили однос између хипотетичког фактора и проблема;Генерално, када мењамо делове за решавање проблема, треба да обратимо пажњу на враћање демонтираних нетакнутих делова на место како бисмо спречили губитак;Формирање добре навике снимања је кључ успеха у решавању грешака.У закључку, када користите ХПЛЦ, важно је обратити пажњу на предтретман узорка и правилан рад и одржавање опреме.
Време поста: 18.09.2023